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伯樂(Bio-Rad)Mini-PROTEAN Tetra 1658006 是含電源的完整套裝,其電泳槽主體與1658004相同,僅增加了PowerPac Basic基礎(chǔ)電源(1645050)。以下為該套裝中電泳槽部分的詳細(xì)標(biāo)準(zhǔn)操作流程:
一、伯樂1658006小型垂直電泳槽制膠(灌制兩塊1.0mm膠)
A、準(zhǔn)備工作
1、耗材: 長玻板(帶封邊墊條)、短玻板、1.0mm梳子、制膠架、制膠框。
2、動作: 將長短玻板底部對齊,插入制膠框的卡槽,扣緊兩側(cè)綠色杠桿鎖。
B、灌分離膠
1、檢測: 將組裝好的玻璃板固定在制膠架上,注水檢測是否漏液。
2、灌膠: 按配方加入TEMED和APS后混勻,灌至綠色帶下緣約2mm處。
3、壓膠: 輕輕加入水、乙醇或異丙醇,室溫靜置20-30分鐘。
4、倒掉: 膠凝固后倒掉壓膠液,用濾紙條吸干邊緣。
C、灌濃縮膠
1、灌滿: 灌入濃縮膠至玻璃板上緣。
2、插梳: 從一側(cè)斜向插入梳子,避免產(chǎn)生氣泡。
3、靜置: 約15分鐘凝固。
二、第二階段:電泳槽組裝與運(yùn)行
1、安裝凝膠
取出: 凝膠凝固后取下玻璃板,沖洗去除碎膠。
裝入: 將玻璃板(短玻板朝內(nèi))卡入電極芯的彈性夾中,用力下壓直至卡緊。
對側(cè): 另一側(cè)可裝第二塊膠,或使用緩沖液擋板(U型塑料板)保持平衡。
2、加緩沖液
內(nèi)槽(關(guān)鍵): 電極芯放入電泳槽,內(nèi)槽必須加滿,液面需淹沒短玻板上緣(即加樣孔頂部)。
外槽: 外槽液位加至刻度線(約2塊膠加700ml,1塊膠加500ml)。
3、上樣與電泳
拔梳: 垂直向上均勻用力拔梳,用注射器吹洗孔道。
上樣: 使用配套的上樣導(dǎo)向裝置(標(biāo)配)可防止扎破凝膠。
蓋蓋: 黑對黑、紅對紅蓋緊上蓋。
連接電源(1658006含PowerPac Basic):
插好香蕉插頭。
常見條件:濃縮膠 80V,分離膠 120V。
溴酚藍(lán)跑至玻璃板底部時停止。
三、第三階段:拆卸與維護(hù)
1、拆卸
斷開電源,取出電極芯,倒掉緩沖液。
推開彈性夾取出玻璃板,用塑料楔子撬開長短玻板。
切去濃縮膠,剝?nèi)》蛛x膠進(jìn)行后續(xù)染色或轉(zhuǎn)印。
2、關(guān)鍵維護(hù)細(xì)節(jié)
密封墊條: 長玻板上的墊條若老化變薄會導(dǎo)致漏液,可單獨更換(型號1653310)。
電極芯: 若電流加不上,檢查鉑金絲是否斷裂、彈性夾是否氧化生銹。
清洗: 電泳后需沖洗綠色卡夾和電極芯,殘留鹽分易導(dǎo)致漏電或電流不穩(wěn)。
玻璃板: 短玻板劃傷嚴(yán)重時易在電泳中破裂,建議定期更換。